腎臟組織是單細胞制備領域出了名的"硬骨頭"。結構致密、血管豐富、細胞類型多樣,再加上大量紅細胞干擾,稍有不慎就會出現細胞破損率高、碎片多、活率低的問題。機械力太強,細胞直接被"打碎";酶解過度,表面標記丟失、細胞活性斷崖式下跌——如何在解離效率與細胞活性之間找到平衡點,是每個做腎臟單細胞實驗的科研人都繞不開的難題。

我們用了上海凈信轉刀款JX-DLDXB系列單細胞懸液制備儀,配合"凈信"腎臟專用解離酶,完成了小鼠腎臟組織的單細胞懸液制備——AOPI染色檢測,活細胞率高達97%!
單細胞懸液制備儀助力腎臟組織細胞懸液制備的案例
1. 實驗組織樣本:小鼠腎臟
2. 制備儀器:上海凈信轉刀款JX-DLDXB系列單細胞懸液制備儀
3. 解離試劑:腎臟專用解離酶(配套終止液、去碎片劑)
4. 制備方式:雙向機械切割 + 酶協同解離
5. 活性檢測:AOPI染色,細胞計數儀檢測
6. 實驗結果:活細胞率 97%
一個看似"普通"的實驗,背后是儀器、酶、流程三個環節的協同優化。接下來對其細胞懸液制備的流程逐一拆解。

全流程拆解:從腎臟組織到單細胞懸液
1. 實驗準備:預制碎冰,冰上解凍單細胞解離酶和酶解終止液;儀器開機,加熱套提前預熱;預冷PBS,準備無菌眼科剪、鑷子、無菌細胞篩、離心管、離心機等耗材并預冷。
2. 組織收集與清洗:小鼠斷頸處死,使用儀器配套灌流儀,灌流后,立即取出腎臟置于冷的PBS中(建議4 h內處理,如需放置更長時間請使用組織保存液)。用預冷PBS清洗,去除血液、壞死組織等雜質,稱重記錄。
3. 剪碎組織:將組織移入配套消化管,剪為小塊的組織碎塊,盡量剪至糊狀。
4. 儀器酶解:將消化管卡入儀器凹槽,安裝加熱套管,設置好參數,點擊啟動。消化途中可單點對應通道暫停取樣查看,消化達標即可提前終止程序,縮短酶解時長。
5. 終止與過濾:待組織完全解離后,先后經細胞篩過濾,加入終止液,全程冰上操作,然后離心、棄上清。
6. 去除碎片:先加PBS重懸,再加入去碎片劑重懸;離心,棄上清。
7. 重懸與質檢:完全培養基重懸細胞沉淀,制備單細胞懸液;AOPI染色檢測:活細胞率97%,培養好,細胞狀態良好。

97%活率背后,靠的是這三重保障
1. 程序溫和,拒絕"暴力解離"
腎臟組織致密,解離時必須"用力",但用力方式決定了細胞死活。單細胞懸液制備儀JX-DLDXB系列采用雙向機械切割+ 酶協同解離的技術路線——以溫和、均勻的切割力持續作用,將組織"拆解"而非"打碎",最大限度保護細胞膜完整性,從源頭守住活率。
2. 組織特異性酶配方:腎臟專用,精準解離
不同組織,細胞外基質成分千差萬別。"凈信"腎臟專用解離酶MJ005針對腎臟組織的細胞外基質特點定制配方,解離更精準、更溫和,配合專用終止液、去碎片劑形成完整解決方案,避免"一刀切"酶解帶來的過度消化。
3. 精細化過程控制:看得見、停得下
加熱套精準控溫,為酶解提供穩定、適宜的溫度環境。單通道獨立暫停取樣,消化到哪一步、狀態如何,隨時"眼見為實",單次暫停≤30 s不影響整體。達標即停,消化充分即可提前終止,少一分過度酶解,多一分細胞活性。全流程低溫護航,過濾、離心全程冰上操作,4℃低溫離心,最大限度抑制細胞凋亡與代謝損傷。
關于轉刀款JX-DLDXB系列單細胞懸液制備儀
上海凈信JX-DLDXB系列單細胞懸液制備儀,采用"雙向機械切割 + 酶"協同解離技術路線,兼顧解離效率與細胞活性:
1. 轉刀溫和解離:適用于腎臟、肝臟、腫瘤等致密組織,細胞活率與得率兼得;
2. 原位/離體灌流程序:內置灌流功能,支持肝臟門靜脈原位灌流、心臟主動脈逆行灌流等應用,為血液豐富的器官提供更優解離方案;
3. 多通道并行:多通道設計,可同時處理多個樣本,提升實驗通量;
4. 標準化流程:參數可設、運行穩定,減少人為誤差,實驗結果可重復。
無論是腎臟、肝臟等致密實體器官,還是腫瘤、皮膚等復雜組織,上海凈信JX-DLDXB系列單細胞懸液制備儀都能提供溫和、高效、可追溯的單細胞制備體驗。

