在組織再生與生物醫(yī)用材料領(lǐng)域，凍干工藝是鎖住生物活性的關(guān)鍵一步，但凍干樣品質(zhì)地堅(jiān)韌、易飛濺，傳統(tǒng)人工研磨往往需要反復(fù)添加液氮、費(fèi)力敲打，耗時(shí)且均勻度難以保證。對(duì)于聚焦豬源細(xì)胞外基質(zhì)與膠原蛋白產(chǎn)業(yè)化的企業(yè)而言，樣本前處理的質(zhì)量直接影響下游分子實(shí)驗(yàn)的成敗。如何溫和而徹底地破碎凍干組織，成為實(shí)驗(yàn)室日常面臨的現(xiàn)實(shí)課題。帶著這一問題，我們走進(jìn)了百奧科瑞的實(shí)驗(yàn)室，看一臺(tái)高通量組織研磨儀如何化解凍干樣品研磨的實(shí)驗(yàn)痛點(diǎn)。
實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/strong>凍干研磨。本次實(shí)驗(yàn)對(duì)象為凍干樣品，研磨過后方便后續(xù)分子實(shí)驗(yàn)(核酸/蛋白)，凍干鎖活，研磨破壁，高效完整提取生物大分子。
實(shí)驗(yàn)選用儀器：超高通量組織研磨儀 JXFSTPRP-1152plus
實(shí)驗(yàn)高通量研磨儀凍干研磨的應(yīng)用優(yōu)勢(shì):
1. 高效快速：高頻研磨，約2分鐘即可完全破壁，效率遠(yuǎn)超人工研磨。
2. 凍脆易碎：液氮預(yù)冷使凍干樣品脆化，配合不銹鋼研磨珠高頻沖擊，粉碎更徹底、粒徑更均勻。
3. 安全密閉：研磨罐密封操作，避免樣品飛濺與氣溶膠擴(kuò)散，減少液氮凍傷與交叉污染風(fēng)險(xiǎn)。
4. 高通量兼容：多罐位適配器可平行處理多樣品，對(duì)稱配平設(shè)計(jì)保障運(yùn)行穩(wěn)定，滿足批量制樣需求。
5. 程序標(biāo)準(zhǔn)化：頻率、時(shí)間、間隔、次數(shù)一鍵設(shè)定，批間一致性好，結(jié)果可復(fù)現(xiàn)。
6. 解放人力：替代持續(xù)加液氮、反復(fù)敲打的繁瑣手工操作，降低對(duì)操作者經(jīng)驗(yàn)的依賴。
高通量組織研磨儀對(duì)凍干樣品前處理研磨的實(shí)驗(yàn)步驟：
1. 準(zhǔn)備高通量研磨儀JXFSTPRP-1152plus一臺(tái)、鋼罐金屬適配器一套、不銹鋼研磨珠若干以及所需研磨凍干樣品若干。
2. 取適量?jī)龈蓸悠贰⑷舾刹讳P鋼研磨珠，將樣品和研磨珠一起放入研磨罐中，蓋子蓋上用羊角扳手固定好。
3. 將配備好的研磨罐用錫紙包好放入液氮中預(yù)冷，凍脆樣品。
4. 將金屬適配器放入研磨儀中固定（適配器底部凹槽與軸的卡槽互相卡牢）放平后將研磨管放入適配器，（注意平面配平，對(duì)稱放樣）蓋上適配器蓋，羊角扳手旋緊。
5. 啟動(dòng)儀器，設(shè)置儀器運(yùn)行的程序參數(shù)，設(shè)置儀器的運(yùn)行頻率、運(yùn)行時(shí)間、間隔時(shí)間、運(yùn)行次數(shù)等。開始研磨。
6. 研磨好后取出研磨罐，倒出研磨后的樣品。
實(shí)驗(yàn)操作注意事項(xiàng)：
1. 液氮操作需佩戴操作液氮的厚橡膠手套，注意安全。
2. 如果凍干樣品塊較大，建議將凍干剪碎成小塊進(jìn)行研磨效果更佳。
高通量組織研磨儀對(duì)凍干樣品前處理研磨前后的實(shí)驗(yàn)效果圖：
上圖為凈信高通量組織研磨儀對(duì)凍干樣品2分鐘的研磨效果，已經(jīng)完全研磨完成。樣品研磨效果非常好，凍干研磨一定要凍液氮，因?yàn)閮龈涉i活，研磨破壁，高效完整提取生物大分子，人工研磨也特別不方便，凍液氮后凍干樣品脆，容易飛濺出來，還要持續(xù)給研缽加液氮，非常麻煩，經(jīng)過多次了解和對(duì)比，老師們選用了上海凈信高通量組織研磨儀代替人工研磨處理，對(duì)凍干樣品的研磨效率高、研磨效果好，同時(shí)也有效解決了老師的樣品研磨問題。
